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SIGMA試劑理論共享

更新時間:2016-11-15      瀏覽次數(shù):1458
  SIGMA試劑靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990.特異性:不與其它細胞因子反應。重復性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
   SIGMA試劑結(jié)果判斷與分析,儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值.以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應的AGEs標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的AGEs含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。檢測值范圍:0-800ng/ml.敏感度: 1.0 ng/ml.
   SIGMA試劑根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應孔內(nèi)。加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照.核心技術(shù),如實陳述.