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Elisa試劑盒實驗時吸光值偏高的原因分析

更新時間:2022-08-25      瀏覽次數:2188
  Elisa試劑盒在實驗時會遇到各種不同的情況,不過導致實驗出問題總是有原因的。有時候ELISA試劑盒實驗會出現吸光值變高的情況,這就讓很多人不解了。下面為大家具體介紹一下為什么elisa試劑盒實驗時吸光值會偏高。
 
  一、室溫太高(大于25℃)。
 
  解決辦法:若無法降低室內溫度,請適當縮短步驟4的溫育時間。
 
  二、底物溶液受到污染。
 
  解決辦法:若發現底物溶液已呈現淡藍色,請不要再使用。
 
  三、原因:反應時間超過太久。
 
  解決辦法:請控制反應時間。
 
  四、原因:酶標記物污染了盒內其它試劑。
 
  解決辦法:使用過的吸頭應立即丟棄,可避免試劑間相互污染,凡是試劑(特別是酶標記物與底物溶液)接觸過的容器應立即清洗干凈。
 
  ELISA法一方面是建立在抗原與抗體免疫學反應的基礎上,因而,具有特異性。而另一方面又由于酶標記抗原或抗體是酶分子與抗原或抗體分子的結合物,它可以催化底物分子發生反應,產生放大作用,正因為此種放大作用而使本法具有很高的敏感性。因此,ELISA法是一種既敏感又特異的方法。酶結合物與相應抗原或抗體結合后,可根據加入底物的顏色反應來判定是否有免疫反應的存在,而且顏色反應的深淺是與標本中相應抗原或抗體的量成正比例的,因此,可以按底物顯色的程度顯示試驗結果。